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【教槽料论坛实录】蒋小丰博士:后抗生素时代下教保料中维持乳仔猪肠道健康的思考(下)

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湖南普菲克生物科技有限公司 蒋小丰 博士
六、如何让酸到达后肠段发挥其抑菌效果

1、制剂剂型技术,包膜定点释放:如包膜丁酸钠

丁酸钠是最近研究比较多的添加剂,它能促进肠绒毛生长,它是结肠上皮细胞的主要供能物质,它能调整肠道微生态、维持肠道健康等,是一种特殊的酸化剂。在谈丁酸钠之前,我想与大家简单聊聊肠道健康。说到肠道健康,大家可能第一时间想到的就是小肠健康,小肠是营养物质消化吸收的主要场所,可以说小肠健康与饲料料肉比相关。而大家往往会忽略了大肠(尤其是结肠)健康,请大家回忆下动物生理,结肠它有什么功能?结肠它是水和无机盐主要的吸收部位,可以说粪便的含水量、成型度与结肠的健康相关,它关系到腹泻投诉。而丁酸钠是结肠上皮细胞主要的供能物质,它对于结肠健康非常重要。


目前,市场上丁酸钠类产品主要有以下几种:

1)、丁酸钠原粉:臭味强烈,易吸潮,在胃中易被吸收等限制其的应用;

2)、丁酸甘油酯:主要是功能成份、含量明确。丁酸甘油酯是丁酸与甘油合成的产品,在合成过程中会产生丁酸甘油一酯、丁酸甘油二酯、丁酸甘油三酯,但只有丁酸甘油三酯才是这类产品的功能成份。丁酸甘油三酯在合成过程中只占10%左右(丁酸甘油一酯占50-60%、丁酸甘油二酯占20-30%),纯化是需要高成本的,所以市面大部分是三者的混合物。

3)、双盐缓冲丁酸钠:关键在“缓冲”二字,它能过胃,是小肠释放型(85%以上在小肠释放);

4)、包膜丁酸钠:要“包得住”、还要“溶得出”。反映包膜类产品的关键指标是溶出度测定:模拟胃肠道内pH值、温度、酶等环境,测定制剂在胃肠道不同时间的累积溶出度,反映制剂在体内的释放情况。为什么要“包得住”呢?因为丁酸钠的作用位点是结肠,它是结肠上皮细胞的主要供能物质。不包膜的丁酸钠容易被胃、小肠吸收,使得到达结肠量很有限。下图显示的是肠优丁的体外溶出度分析:肠道内缓释,其中结肠内的释放度达50%。


“溶得出”有两个意思:一是到结肠要释放出来(上面已经提及);二是不要“穿肠而过”。因为食糜在动物肠道中停留时间有限(前面我们说45日龄仔猪是16-19h),如果超过这个时间包膜丁酸钠就随粪便排出体外,造成浪费了。下图比较了肠优丁(紫色线)与市场某包膜丁酸钠(黄色线)的肠道内溶出度。



2、直接添加到后肠产酸的益生菌制剂


益生菌制剂简单来分可以分为三类:芽孢菌、乳酸菌、酵母菌。说到产酸的益生菌,大家可能第一时间会想到乳酸菌,乳酸菌产酸能力强。但是乳酸菌抗逆性差,无法耐受:饲料加工制粒的高温、高压;重金属;药物;贮存运输;动物胃酸、胆碱等。所以,普通乳酸菌不适合畜牧行业使用!关于包膜乳酸菌大家可以从包膜工艺、包膜材料、性价比等方面做些思考,我这里不再多谈。

那么什么样的微生态适合于畜牧业应用呢?畜禽用微生态制剂需满足以下条件:1)无毒、无致病性;2)抗逆性强,耐高温制粒、耐胃酸、胆碱等;3)在动物体内能代谢,并产生有益代谢产物。枯草、地衣为代表的芽孢杆菌虽然抗逆性强,但其几乎不产酸。


我今天要与大家介绍的是一个既产芽孢又产酸的微生物菌种--凝结芽孢杆菌。凝结芽孢杆菌在饲料添加剂品种目录(2013)已经允许使用。说到这里我想简单的说声,在人的益生菌中肠球菌类是存在争议的,有兴趣的朋友可以上网查找相关资料


前面我们谈到芽孢杆菌,它是好氧菌,产芽孢,但不产乳酸;乳酸菌是厌氧菌,产乳酸,但不产芽孢。凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌,既产芽孢又产乳酸,所以它是乳酸菌和芽孢菌优点的集合体,可以说它代表着动物微生态未来的发展方向。


接下来我们看看凝结芽孢杆菌大概的作用机理。我们知道动物肠道食糜不同部位其含氧气量是不同的:小肠前段是微氧、中后段是厌氧。枯草、地衣等好氧菌主要作用位点在小肠前段,消耗氧气,产酶,提高营养物质消化率,进而提高动物生产性能;乳酸菌等厌氧菌作用位点在中后段,产乳酸。凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌,它能全肠道发挥作用,前肠段耗氧,以后代谢产酸,降低肠道pH值、抑菌,维持肠道微生态平衡,提高动物肠道健康,进而提高动物生产性能。从肠道健康角度看,产酸更有益。


在凝结芽孢杆菌这块我们也做了一些工作,在阐述凝结芽孢杆菌产酸之前,我想简单说说这个菌种的来龙去脉。我们前面说过畜牧行业用微生态需要抗逆性强,也就是要产芽孢。对肠道健康来说产酸更有益,因此又要产酸。同时结合肠道大部分是厌氧环境特点,要求微生态能厌氧代谢。基于这三个方面,我们从健康猪肠道样品中,健康鸡肠道样品中和养殖水体样品中采用芽孢染色、pH测定和厌氧代谢等方法进行筛选,最后得到3 株产酸产芽孢又能厌氧代谢的菌。同时,为了验证这3株菌的特性我们进行了形态学分析、生理生化分析及基因方面的分析,并确定了菌株的种属关系为凝结芽孢杆菌。




回到咱们酸的话题,凝结芽孢杆菌能产酶、产抑菌素,更重要的是它能产乳酸。我们在一个平板上涂满0.1%碳酸钙,然後把它分成A、B、C、D四个区域,A,接种蜡样芽孢杆菌;B,凝结PFK1202;C,乳酸菌;D,凝结PFK1202。看它们产酸水解碳酸钙透明圈大小,由图可看出B、D中凝结PFK1202水解透明圈大于其他两种菌。测定直径大小发现:B、D凝结PFK1202水解圈的直径为15.03mm、14.35mm,而乳酸菌仅10.1mm。

 

这个图比较了凝结PFK1202与乳酸菌产酸能力,从结果看,凝结PFK1202比乳酸菌的产酸量稍大,在培养4小时后,培养液pH从6.3降低到4.5以下。

可见,从产酸角度看,凝结PFK1202产酸能力可以与乳酸菌媲美!


我们对凝结芽孢杆菌对仔猪胃肠道内容物pH值影响也做了研究。发现饲喂后,试验组猪从胃开始,一直到直肠内容物酸度都有降低,并且越到消化道后段,其pH值降低相对越明显。说明凝结芽孢杆菌在仔猪胃中就开始萌发代谢产酸,一直到肠道后段。


七、强化后肠酸抑菌作用,提高肠道健康


我们今天说了酸化剂,外源酸化剂它能酸化饲料,酸化胃。但由于其在胃中解离、吸收快,一般很难达到后肠道来发挥“抑菌性酸”的作用。要想让酸到达后肠段发挥抑菌作用,我们可以把酸包膜定点释放(如包膜丁酸钠),或者添加能产酸的微生态(如凝结芽孢杆菌),让它产酸抑菌。外源酸化剂降低胃中pH值,提高蛋白质消化,减少蛋白质不良发酵,同时防止“病从口入”。而后肠酸送达或后肠段产酸微生态能调节肠道后段微生态平衡,提高肠道健康度,减少腹泻发生。


总结


1、酸是乳仔猪天然存在的抑菌物质,乳仔猪由于胃酸分泌能力较弱,酶活性也较低,故消化能力较差,易腹泻;

2、酸化剂能“酸化”饲料,“酸化”胃,发挥“消化性酸”的作用,却难以到达后肠段发挥抑菌作用。

3、外源酸化剂联合后肠段酸(如包膜丁酸钠)的定点释放和内源产酸微生态凝结芽孢杆菌制剂强化后肠酸抑菌性。



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